| Határozat száma |
- |
BGMF/287-7/2025 |
| Határozat címe |
- |
Géntechnológiával módosított szervezetek 2. biztonsági elszigetelési szintű zárt rendszerben történő felhasználásának engedélyezése a Debreceni Egyetem Általános Orvostudományi Kar Orvosi Mikrobiológiai Intézet részére |
| Évszám |
- |
2025 |
| Határozat típusa |
- |
Engedélyező határozat |
| Kiadmányozás dátuma |
- |
2025-06-17 |
| Kérelmező címe |
- |
Hajdú-Bihar Vármegye, 4032 Debrecen, Egyetem tér 1. |
| Tevékenységbe bevont laborok |
- |
2.8. retrovírus laboratórium (Orvosi Mikrobiológiai Intézet, In Vitro Diagnosztikai Tömb, 2.
emelet):
- replikáció deficiens vírusvektorok előállítása, a vektorba virális fehérjéket kódoló
szakaszok beépítése; különböző sejtvonalak retrovírus vektorral történő transzdukciója;
a tanszdukált sejtek lízisét követően fehérjék és nukleinsavak kinyerése további,
molekuláris biológiai vizsgálatok céljából
- génszintézissel előállított virális genomszakaszok ligálása, teljes polyomavírus
genomok létrehozása; a polyomavírus genomok transzfektálása BSL-1 és BSL-2
kockázati szintű, humán és állati sejtekbe; a transzfektált sejtek inkubálása; a sejtek
lízise, nukelinsav, fehérje izolálása, valamint esetlegesen BSL-2 szintet igénylő
virionok izolálása
2.10.2 szövettenyésztő I. laboratórium (Orvosi Mikrobiológiai Intézet, In Vitro Diagnosztikai
Tömb, 2. emelet):
- BSL-2 szintű sejtek fenntartása, inkubálása, passzálása
- BSL-1 és BSL-2 kockázati szintű humán és állati sejtek tranziens transzfekciója
plazmidokkal; a sejtek inkubálása
- a sejtek lízise, nukleinsav és fehérje izolálásának céljából
- vírus szekvenciákat tartalmazó sejtvonalakban (például a kereskedelmi forgalomban
kapható, HPV pozitív HeLa, CaSki és hasonlók) a virális gének kifejeződésének gátlása
(például siRNS)
- oligonukleotid irányított mutagenezissel természetben előforduló HPV promóter
variánsok és korai vírus fehérjéket (például E6 és E7) kódoló gén variánsok vizsgálata
2.29 steril laboratórium (Orvosi Mikrobiológiai Intézet, In Vitro Diagnosztikai Tömb, 1.
emelet):
- plazmid vektorok létrehozása; kereskedelmi forgalomban kapható vektorokba
szintetizált virális szekvenciák, gének és szabályozó régiók, promóterek, enhancerek
inszertálása
baktériumok és GM baktériumok szaporítása; a GM baktériumokat tartalmazó
táptalajok inkubálása;
- a plazmidok tisztítása a baktériumokból;
- GM baktériumokban fehérjeexpresszió;
- expresszált fehérje kinyerése GM baktériumok lízisével
Kiszolgáló helyiség, amelyben GMO tevékenység nem zajlik: sterilező helyiség, 1. emelet,
Orvosi Mikrobiológia Intézet, In Vitro Diagnosztikai Tömb:
- autoklávozás: a sterilező kiszolgáló helyiségben található autokláv, ahová zárt
tárolókban szállítjuk a GMO tevékenység során szennyezett, inaktivált, sterilizálandó
eszközöket
Kiszolgáló helyiség, amelyben GMO tevékenység nem zajlik: tároló, In Vitro Diagnosztikai
Tömb alagsor:
- GMO-k, GMCC-k, GVV-k tárolása ultramélyhűtőben és folyékony nitrogénben |
| Biztonsági elszigetelési szint |
- |
2. szint |
| Környezeti kockázatértékelés |
- |
A Kérelmező által használt, 1-es kockázati csoportba tartozó, emberre, állatra nézve nem patogén E. coli laboratóriumi törzsek, valamint a primer és immortalizált humán sejtkultúrák emberre, állatra és egyéb élőlényekre, valamint a környezetre nézve nem ártalmasak. Az alkalmazott E. coli törzsek nem rendelkeznek fokozott környezeti tűrőképességgel, nincs fokozott toleranciájuk UV-val, hőmérséklettel vagy kiszáradással szemben. Egyes baktériumok (például a fehérjeexpresszióhoz használt Origami és Rosetta-gami törzsek) speciális tulajdonságaikat csak laboratóriumi körülmények közt, szelekciós anyagok használatával tartják meg. Az alkalmazott expressziós vektorok nem kódolnak olyan genetikai információt, amely szelekciós előnyt biztosítana a recipiens baktériumok és sejtkultúrák számára, vagy amely állatokra, növényekre nézve ártalmas lehet. A retrovírusok túlélése a környezetben nem igazán jó, és ezt valószínűleg a rekombináns gének jelenléte sem változtatja meg. A retrovírus vektor rágcsáló eredetű vírus, így a vírus vektor meg tudná fertőzni a rágcsálókat is, viszont - mivel defektív vírus - állatról állatra vagy emberre már nem tudna terjedni. A vírus vektorba virális onkogének is beépíthetők. Amennyiben a retrovírus vektor megfertőzné az állatot, akkor elvileg nem kizárható a megfertőzött állatban a daganatképződés.
Nem várható, hogy a GMO tevékenység során esetlegesen keletkező polyomavírus virionok környezeti tűrőképessége eltérne a polyomavírusok normál környezeti tűrőképességétől. A potenciálisan humánpatogén polyomavírusokról nincs információ, hogy más élő szervezetet képesek-e megfertőzni, patogén szerepük még emberben is kérdéses. A polyomavírusok erősen gazdafaj-specifikusak, ez alapján sem várható, hogy más élő szervezetre veszélyesek lennének. A polyomavírusok mindegyike tumor antigént kódol. A polyomavírusok esetében nem áll rendelkezésre olyan információ, hogy veszélyt jelentene valamilyen szervezetre.
A környezeti kockázat szintje: alacsony. |
| Balesetelhárítás |
- |
A GMO-k feldolgozásához használt laboratóriumi eszközök és tároló edények felnyitását igénylő munkafolyamatokat kizárólag 2-es szintű biztonsági fülkében hajtják végre a kontamináció és a levegőben való terjedés megakadályozása érdekében. Belépés csak megfelelő képzettséggel rendelkezők számára lehetséges, a mágneszáras ajtó nyitása kívülről csak kóddal, biztonsági, azonosító kártyával lehetséges. A GMV-vel dolgozó laborban HEPA szűrővel ellátott, központi szellőztető berendezés biztosítja a légcserét, a munkavégzés HEPA szűrős, BSL-2 fülkében történik, ezzel megakadályozható a GMO és a polyomavírus terjedése, a kontamináció. Laboratóriumi védőköpeny, egyszer használatos gumikesztyű és védőszemüveg minden laboratóriumban rendelkezésre áll, használata kötelező. A géntechnológiával módosított mikroorganizmusok a GMO előállítására és feldolgozására kijelölt helyiségek között zárt, sterilizálható vagy égetéssel megsemmisíthető edényben szállíthatók. GMO-val történő munkát csak megfelelő laboratóriumi gyakorlattal rendelkező dolgozó végezhet, illetve a betanulási időszak alatt GMO-val történő munkában jártas kollégák felügyelete és a laboratórium rendjének betartása mellett. Az érintett dolgozók elméleti és gyakorlati munkavédelmi oktatásban részesülnek.
A Debreceni Egyetem érvényes munkavédelmi szabályzattal rendelkezik (https://munkavedelem.unideb.hu), amely balesetelhárítási tervet is tartalmaz. A zárt rendszerű géntechnológiai tevékenységet végző létesítményben dolgozó személyek rendszeres balesetvédelmi oktatásban részesülnek. Amennyiben GMO szennyezett anyag kerülne a dolgozókra, a szennyezett ruházatot el kell távolítani, az esetlegesen érintett bőrfelületet fertőtleníteni kell, szükség esetén pedig orvosi segítséget kell kérni. A laboratóriumi felületekre jutott GMO-t nátrium-hypoklorit oldattal vagy perecetsav alapú oldattal vagy kvaterner ammónium bázisú oldattal inaktiválják, majd a szennyeződést eltávolítják, és a hulladékkezelési tervnek megfelelően megsemmisítik. |
| Nyomonkövetés |
- |
Érvényes: 2035. május 14. |
| Publikus |
- |
Igen |
| Kérelmező neve |
- |
Debreceni Egyetem |
| Engedély típusa |
- |
GM szervezetek és azokból előállított termékek zárt rendszerű felhasználása |
| Felhasználható szervezet(ek) |
- |
E.coli (XL1-Blue, DH5 α, NovaBlue, TOP10 családba tartozó, vagy hasonló tulajdonságokkal rendelkező kompetens baktériumok) / E.coli (BL21, Rosetta, Origami, B(DE3)pLacI, Rosetta-gami B(DE3)pLacI és hasonló, speciális tulajdonságokkal rendelkezők) / Humán primer sejtek (illetve HaCat, MCF7, A549, HEK-293, 293TT, MRC-5, SKHEP1, Caco2, Vero, Vero-E6, C33A, CaSki, HeLa, HEKn és hasonló sejtvonalak) |
| Feltöltött határozat |
- |
BGMF_287-7_Debreceni Egyetem_zártrendszer_.pdf.pdf |
| Felelős vezető(k) neve |
- |
Dr. Kónya József, Dr. Csoma Eszter |
